技術文章 / article
采用肺炎衣原體試劑盒測試的試驗步驟
2019-08-07 瀏覽次數:1608
肺炎衣原體試劑盒可通過檢測IgM抗體來早期診斷肺炎衣原體現癥感染,僅用于體外診斷。肺炎衣原體(TWAR)是一種新出現的有傳染性的因子,可引起一系列臨床表現,包括上呼吸道和下呼吸道感染。衣原體肺炎感染一般是溫和的、無癥狀的,然而,肺炎衣原體感染可能會引起一些嚴重的疾病如:咽炎、竇炎、急性支氣管炎和社區獲得性肺炎。如果未檢測出和未進行治療,此感染可能會導致長期持久的疾病,數據顯示了肺炎衣原體感染和慢性疾病的關聯。
采用肺炎衣原體試劑盒測試的試驗步驟:
1.配制洗滌液:1瓶濃縮洗滌液加480ml蒸餾水。
2.待試劑盒平衡至室溫后,待測標本用標本稀釋液按1∶40稀釋,即取5μl血清與200μl標本稀釋液混合。
3.各加100μl陽性、陰性對照及已稀釋待測標本上清液于相應孔中,空白對照孔加100μl標本稀釋液。
4.蓋好反應板,37℃孵育30分鐘。
5.甩盡板中液體,用200—300μl洗滌液洗5次,每次均需拍干。
6.每孔加酶聯物兩滴或100μl,蓋好反應板,置37℃30分鐘。
7.甩盡板中液體,洗5次,每次拍干。
8.加底物A及B各一滴或各50μl,混勻,37℃15分鐘。
9.目測:在白色背景下觀察各孔顯色的情況。有明顯藍色者為陽性(明顯藍于陰性孔),無色者為陰性(和陰性相近)。
10.酶標儀檢測:每孔加終止液1滴(50μl)輕拍混勻,用酶標儀(450nm波長)測定各孔OD值。
本試驗結果需結合臨床表現、病史及其他診斷結果方可采取適當臨床處理。肺炎衣原體試劑盒已含有消除干擾因子之物質,但仍可能有RF強陽性之標本難以盡除干擾,如某標本幾項均為IgM陽性,應用RF試劑盒檢測,如為RF陽性,建議可排除IgM陽性。
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